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淺析StemRD生長(zhǎng)分化因子的使用注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2018-08-24 點(diǎn)擊次數(shù):1400
StemRD生長(zhǎng)分化因子基因zui早在果蠅中作為體節(jié)極性基因被發(fā)現(xiàn),Hedgehog基因編碼一種分泌信號(hào)蛋白,突變會(huì)使無(wú)毛部分變成有毛部分,所以又戲稱(chēng)為“刺猬”基因。哺乳動(dòng)物發(fā)現(xiàn)其同源基因有3個(gè),分別為Sonic Hedgehog(SHh)、Indian Hedgehog(IHh)和Desert Hedgehog(DHh)。SHh 前體蛋白要經(jīng)過(guò)一系列剪切與修飾,首先SHh 前體蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)剪切去掉信號(hào)肽,,然后經(jīng)過(guò)自我酶解形成19 kDa N 端蛋白和25 kDaC 端蛋白,SHh-N 端蛋白發(fā)揮了SHh信號(hào)分子的功能,執(zhí)行SHh信號(hào)通路的主要功能。C 端蛋白擁有末端膽固醇轉(zhuǎn)移酶活性,可以將膽固醇分子轉(zhuǎn)移到SHh N 端蛋白的C 端,末端的膽固醇分子可以和細(xì)胞膜結(jié)合而錨定SHh N 端蛋白,從而有效控制SHh N 端蛋白的作用區(qū)域。
StemRD生長(zhǎng)分化因子注意事項(xiàng):
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物請(qǐng)避光保存。
嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

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